双丙酸铵带你了解饲料防霉剂杀菌效力的判定及其综合评价

为保证饲料厂家用好优质饲料防霉剂，以减少饲料发霉，双丙酸铵着重阐述了优选防霉剂的方法、优缺点和应该注意的问题，从而对防霉剂给以准确地评价。

1、杯碟法——测定最大抑菌圈直径

本法采用杯碟中加入一定剂量防霉剂液在琼脂平板上扩散，根据抑菌圈直径大小来定量测定其直径效果。

先将一定规格的不锈钢牛津杯（1.0×25px、0.8×25px），轻轻垂直置于上层带定量规定试验菌琼脂平板上，杯中加入一定剂量的被测防霉剂配制液，小心平置于培养箱(28±1℃)中培养2～3d，在菌体生长的同时，防霉剂液均匀扩散到琼脂平板上，抑制杯周围菌孢子的生长，从而产生不长菌的透明抑菌圈，抑菌圈直径越大，则表明抑菌效果越显著。操作过程中，供试菌悬液菌浓度应控制在案106个～107 个/mL

，防

霉剂剂量在0.8%～0.16%。

常见的防霉剂，绝大多数是有机酸、有机酸盐、有机酸酯等或多种成份的复配型粉剂，经常水、油溶共存，因此在配制剂液时必须选配一种理想的溶剂，此溶剂既可将防霉剂水、油溶有效成份从载体上完全溶解下来，又在试验中对受试菌没有抑制作用。

此法的特点，是它能定量比较防霉剂的抑菌效果，速度快，结果准确，但实验操作复杂，要求较高。

2、最低抑菌浓度（MIC）法

   本法是根据防霉剂能够抑制霉菌生长的最低抑菌浓度来判断防霉剂抑菌效果，抑菌浓度愈低，防霉效果愈佳。

它是将各种防霉剂配成浓度梯度液，加入上层带定量受试菌平板的牛津杯中，置配养箱（28±1℃）配养2～3d，由菌生长情况定出最低抑菌浓度，要求精确可继续细分浓度梯度值。也可按防霉剂浓度梯度将防霉剂液直接加入培养基中（培养基的量稀释防霉剂浓度的因素要事先考虑进去），轻慢摇动，让药剂在培养基内均匀分散，当培养基凝固后，用白金耳按顺序放射状地划线接定量（106个～107个/ml）试验菌悬液。标记，置配养箱（28±1℃）内配养2～3d，从平板浓度由底到高的菌生长与否定出MIC值。要求精确可继续细分浓度梯度值。

3、饲料强化防霉（破坏性）试验

本法是提高饲料水分点，恶化试验环境（高温、高湿）促使饲料尽快发霉，根据霉变严重程度及测霉菌数来判断防霉剂防霉效果。

先制作好适当水分的饲料，饲料水分应均匀渗透到同一水分点，且水分控制在16%～17%，水分调试过高（>20%），谷物中可利用水增高，大大增加水的活性，而霉菌或微生物生长严格受到底物水活性的影响，试验强化太大，结果会出现较大误差，水分太低，试验时间太长。

称取已制作好水分的饲料，再包封放置2hr～3hr或过夜，按试验设计的浓度在剧烈搅拌中加入防霉剂，待搅拌均匀，装三角瓶（用牛皮纸包扎瓶口）或塑料袋中，置温、湿培养箱（温度35～38℃,相对湿度95%以上）培养，定期检测霉菌数（GB13092-91）。

此法作为防霉剂性能评判的中期试验，试验结果较直观，在较短时期内（10­­～20d）即能得出防霉效果。对各种类型防霉剂的评价普遍适用，缺点是试验时间仍显较长，对防霉功效相近的防霉剂其结果不够准确。

4、饲料常规试验

本法是以正常饲料（水分自然11%～12.5%），在自然环境下储放，按规定的时间抽样进行霉菌检测判定其防霉效果，具体方法同饲料强化防霉。

此法对各类防霉剂的期效试验说服力强，可作为防霉剂的终选试验，其最大的弊端是完成时间长，需2～3个月。

5、二氧化碳释放顶空测试法

本法是根据饲料受霉菌作用（剧烈代谢）而霉变腐烂的过程中会产生CO2，通过间接测定释放出的CO2产量来判断防霉剂效果。在相同时间内产生CO2量越大，即达到特定的CO2产生量所需时间越短，饲料霉变成度越重，产生CO2量与防霉剂防霉效果成反比。

方法是将制作好水分（15%～16%）的饲料称取适量（200～300g）按试验设计浓度加入防霉剂搅拌均匀，装三角瓶并将样品表面铺平置培养箱（30～35℃，90～95%）储放，5～6d后用配套具空橡胶塞盖、封，密封瓶口一昼夜聚集CO2气体，开始采用CO2测定仪或Drager氏气体检测器及CO2管（CH23501）等测其产量，在规定时间间隔内重复测定。以不加防霉剂样为对照。

最初试样比较稳定，释放CO2量少1%以下，使用较敏感的检测器，当CO2急剧增加时，使用较不敏感的检测器。CO2急剧增加，平衡受到破坏，则表明饲料中霉菌

生长繁殖旺盛，代谢增强，饲料开始发霉。因此，产生CO2时间越长，产量越少的试样防霉效果越佳。

此法对选择各种类型的防霉剂都可行，掌握CO2量指标反映防霉剂防霉效果，优于专一霉菌方法，该法快速，实用方便，结果客观，技术要求不高。缺点是很难掌握急据释放CO2的时间，需把握临界时段。

6、温度测定法

饲料异常发热是饲料霉变的前兆。饲料发热和霉变是紧密相关的，饲料发热容易生霉，而生霉之后又往往促进发热，储料发热主要是与微生物活动有关，微生物大量生长繁殖，其呼吸旺盛，释放大量的热，促使饲料开始霉变，霉变是储料微生物活动的结果。因此，测定温度指标能定性地说明防霉剂的防霉效果。一般饲料不容易传热，它的变化比环境温度变化慢，有滞后现象，并且温度变化幅度比环境温度变化小。当测定若饲料温度长高幅度在2～5℃，即可判定饲料发热，发热后1～3天内开始有轻微霉点出现，在规定时间间隔内测定饲料温度，试样温度先跃升，且幅度大的防霉效果不佳。